KAI Chudinov, V.A. Platonov, A.V. Alexandrova, S.N. Elansky
I whakaatuhia ake nei ko te harore ascycete Ilyonectria crassa ka kaha ki te pangia i nga kūmara potato. Ko tenei mahi te tuatahi ki te wetewete i nga ahuatanga koiora me te aukati i etahi fungicides o te I. crassa riaka wehe mai i te riwai. Ko nga raupaparanga o nga rohe-a-rohe o te momo "potato" i taapiri ki nga mea i whiwhi i mua mo nga harore i wehe mai i nga putake o te daffodil, ginseng, aspen me te beech, nga topuku rengarenga me nga rau tulip. Te ahua, he maha nga tipu mohoao me te maara ka waiho hei rahui mo I. crassa. I pangia e te riu o te tirotirohia te huamato me nga poro potato, engari kaore i pangia nga hua katoa o te Tomato me te kūmara potato mau. E whakaatu ana tenei ko te I. crassa he werau werau. Ko te arotake i te aukati ki te fludioxonil, te difenoconazole me te azoxystrobin i runga i te kaupapa matūkai i whakaatu i te kaha o enei rongoa.
Ko te tohu EC50 (ko te kukume o te fungicide, e heke haere ana i te 2 wa te tere o te tipu tuwhena o te koroni e pa ana ki te mana kore-fungisida) he rite ki te 0.4; 7.4 me te 4 mg / l. Ko te taea o te whanaketanga o te tahumaero na I. crassa me whakaaro i te wa e aromatawaihia ana te kohinga tupato i nga kūmara potato me te whanake i nga tikanga tiaki tipu.
Ko te whakawhanaketanga o nga microorganism phytopathogenic ka nui te ngaronga o te tipu me te penapena riwai. I te wa e whakamahere ana i nga tikanga whakamarumaru, hei tikanga, ka tirohia nga pathogens rongonui, penei i nga momo o te puninga Alternaria, Fusarium, Phoma, Helminthosporium, Colletotrichum, Phytophthora, me etahi atu Heoi, i nga tau kua hipa, he maha nga korero kua puea ake mo te ahua o te rauropiiao hou ki runga i nga riwai. Kaore i te akohia te koiora, kaore i te mohiotia te whaihua o te fungicides i runga i nga riwai, kaore ano kia whanaketia nga tikanga tirotiro. Na te whanaketanga papatipu, ka kaha te raru o te hua o te riwai. Ko tetahi o enei koiora ko te harore rite tonu Ilyonectria crassa (Wollenw.) A. Cabral & Crous, i kitea tuatahihia e nga kaituhi i runga i nga kūmara potato (Chudinova et al., 2019).
Ko tenei mahi e whakaatu ana i nga hua o te wetewete i te mahanga I. crassa i wehea mai i nga kūmara potato. Te morphology o nga koroni me nga hanganga mycelial o I. crassa, nga raupapa ngota-a-rohe o nga momo-rohe DNA motuhake, te parekura ki te riwai me te tomato, me te aukati ki etahi fungicides rongonui i rangahauhia.
Nga rauemi me nga tikanga
I whakamahia e maatau te raru I. crassa 18KSuPT2 i wehea i te tau 2018 mai i te kūmara potato pangia i tupu i te rohe o Kostroma. I pangia te kūmara e tetahi momo pirau maroke me te kohao e kapi ana i te mycelium parauri marama. Ma te whakamahi i te ngira wehe ke, ka tukuna te mycelium harore ki roto i te rihi Petri me te tikanga agar (pia wort 10%, agar 1.5%, penicillin 1000 U / ml). I whakauruhia nga pereti i te pouri i te 24 ° C.
He miihikohiko marama Leica DM2500 me te kaamera mamati ICC50 HD me te miihini miihini binocular a Leica M80 me te kaamera mamati IC80HD (Leica Microsystems, Tiamana) i whakamahia hei whakaahua, aromatawai i te rahi me te taatai o nga korokoro me nga wheua matakoro.
Hei wehe i te DNA, i whakatipuhia te mycelium harore i roto i te momo peihi wai, katahi ka whakatotokaina ki te hauota waipiro, homogenized, ka whakauruhia ki roto i te miihini CTAB, ka purea ki te chloroform, ka horoi rua ki te 2% waipiro.
Ko te tikanga tangohanga DNA e whakamarama ana i te tuhinga a Kutuzova et al. (2017).
Hei whakatau i nga momo ma nga tikanga hakihaki me te whakataurite ki etahi atu momo uaua I. crassa, i mahia te PCR me nga tiimatanga e ahei ai te whakanui i nga rohe DNA motuhake-momo: ITS1-5,8S-ITS2 (primers ITS5 / ITS4, White et al., 1990), rohe ira b -tubulin (Bt2a / Bt2b, Glass, Donaldson, 1995) me te whakamaoritanga whakarerenga take 1α (tef1α) (primers EF1-728F / EF1-986R, Carbone and Kohn, 1999). Ko nga amplicons o te roa e hiahiatia ana i tangohia mai i te reera ma te whakamahi i te kete Evrogen CleanUp. Ko nga rohe kua whakarahihia kua whakaraupapahia ma te whakamahi i te Kete Whakatakoto Huringa BigDye® v3.1 (Putaiaoiao, CA, USA) i runga i te Haangai Miihini 3730 xl whakarurutanga aunoa (Applied Biosystems, CA, USA). Ko nga raupaparorohiko nukarau i whiwhi ki te rapu taimana i te papaanga GenBank o te US National Center for Biotechnology Information (NCBI). I whakamahia te taatai Phylogenetic ma te whakamahi i te kaupapa MEGA 6 (Tamura et al., 2013).
Ko te whakatau i te moepuku i whakatutukihia ki runga i nga hua kaakaariki katoa o te tomato nui-hua (momo Dubrava) me nga kūmara potato (momo Gala). Hei taapiri, hei whakatauira i te kino o nga hua me nga kūpara kua pakaru, i whakamahia e maatau etahi poro o nga hua me nga kōpura. Ko nga poro kūmara i whakatakotoria ki roto i nga ruma haukū, ko nga peihana Petri me te pepa taatai maku i raro. I whakauruhia he reti ki runga i te pepa, ka huri ki runga, ka kowhihia nga poro o te kūmara, o nga hua ranei. I whakauruhia katoatia nga kōpura me nga hua ki roto i nga ipu me te pepa tatari maku i raro. I waenga o te poro (i runga ranei i te mata tuuturu o te kūmara, o nga hua ranei), i whakatakotoria he pihi agar (5 × 5 mm) me te hyphae harore i muri i nga ra e 5 e tipu ana i te agar wort.
Ko te aromatawai i te aukati i nga taumahatanga harore ki nga fungicides i whakahaerehia i roto i nga tikanga taiwhanga i runga i te reo matūkai agar. I akohia e maatau te awangawanga ki nga raau fungicidal Maxim, KS (whakauru kaha fludioxonil, 25 g / l), Quadris, KS (azoxystrobin 250 g / l), Scor, EC (difenoconazole 250 g / l) (State rārangi ..., 2020). I whakahaerehia te aro mātai i roto i nga rihi a Petri i runga i te reo wort-agar me te taapiringa o nga raau taero i akohia i nga kukutanga o te matū hohe 0.1; kotahi; 1 ppm (mg / L) (mo te fludioxonil me te difenoconazole), 10; tekau; 1 ppm (mo te azoxystrobin) me te ao papaho kaore he whakamate (whakahaere). I whakauruhia te fungisida ki te mea rewa, ka whakamatao ki te 10 ° C reo, muri iho ka ringihia te reo ki nga rihi Petri. I whakanohoia he poraka agar ki te mycelium harore ki waenga o te rihi Petri ka whakatoihia i te mahana o te 100 ° C i te pouri. I muri i nga ra e 60 o te whakaurunga, ka whangangahia nga diameter o nga koroni i roto i nga tohutohu e rua e hono ana ki te taha. ko nga hua inenga mo ia koroni i toharite. Ko nga whakamatautau i mahia takirua. I runga i nga kitenga o te wetewete, ka tatau te EC24, he rite ki te kukume o te fungisida, na te haurua o te tipu o te tipu o te koroni e pa ana ki te mana fungicidal.
Nga hua me nga korerorero
I runga i nga rihi petri me te agar wort, ka hangaia e te harore nga koroni me te mycelium flocculent ma. Ko te reo i raro o te mycelium i huri i te parauri parauri. Ka maroke te reo, ka whakaputahia e te harore he momo e rua nga momo i runga i nga conidiophores kotahi me te whakahiatotanga i roto i te sporodochia iti. Ko te Macroconidia he roa, porotakaroa, kotahi ki te toru septa, te roa toharite 27.2 µm me te whānuitanga o nga uara mai i te 23.2 ki te 32.2 µm, te whanui - tae atu ki te 4.9 µm (Whakaahua 1). Ko te roa toharite o te microconidia ko 14.3 µm me te whānuitanga o nga uara mai i te 10.3 ki te 18.1 µm, ko te whanui tae atu ki te 4.0 µm. Katoa nga tohu a-tonotono me te micromorphological ka uru ki te rereketanga o te momo Ilyonectria crassa (Cabral et al., 2012).
Ko nga raupapa o nga rohe DNA motuhake-momo (ITS, b-tubulin, TEF 1α) i tino haangai ki nga raupaputanga o te I. crassa taumahatanga i akohia e maatau i mua (Chudinova et al., 2019, Ripanga 1). Ki te rangahau i te paanui o te I. crassa i etahi atu rohe me te wetewete i te whanuitanga o nga ahurea e pa ana, i taatuhia nga raupapa DNA taatai i roto i te papaarangi GenBank (Ripanga 1). Ko te taupoki he 86 ki te 100%. Ko nga raupapatanga o nga rohe DNA e toru o te “potato” I. crassa riaka he orite ki nga raupapa o nga riaka i wehea mai i te umanga rengarenga me nga pakiaka narcissus i Netherlands me te pakiaka ginseng i Canada. Kare i kitea e maatau etahi atu momo raru I. crassa me te toru o nga raupapa i taatarihia i nga papaanga tuwhera. Heoi, ko te wetewete i nga whakatakotoranga ITS me nga raupapa b-tubulin i whakaatu i te aroaro o te I. crassa i runga i nga rau tulip i te UK. Ko nga harore me te raupapa ITS rite i kitea i te taatari i te mycobiota o nga pakiaka aspen i Canada me nga pakiaka pi i Itari, nga kūmara potato i Saudi Arabia (Ripanga 1). Ko nga hua o tenei rangahau e whakaatu ana ko te I. crassa he tohatoha o te ao ka kaha ki te pangia e nga momo tipu.
A, no te whakatau i te pathogenicity i runga i nga poro o te tumato me te riwai i te 5 o nga ra, ko te diameter o te whara i tae atu ki te 1.5 cm. Heoi, i pa nga tuumomo ki te tumato. Hei whakakore i te taea o te paru, he wehenga harore mai i te mycelium i hangaia i runga i te poro kūmara potato i wehea ki te ahurea ma. He orite katoa ki te maatanga o nga maatua. Te ahua, ko te I. crassa he werau werau.
Ko te rongoa i mua i nga purapura korere me nga fungicides e whakaiti ana i te whanaketanga o nga mate ki nga tipu i te waa e tipu ana. Mo te kowhiringa o nga fungicides whaihua, he mea nui kia aromatawai ko wai o raatau e whai hua ana ki te I. сrassa. I akohia e te mahi nga matū kaha o te fungicides - fludioxonil, azoxystrobin, difenoconazole. Ko te Fludioxonil kei roto i nga tini ranunga e whakamahia ana mo te whakakakahu purapura me nga kūmara purapura i mua i te whakatō. Ka whakamahia hoki te Fludioxonil (Maxim) ki te hamani i nga kūmara purapura i mua i te rokiroki. Ko te Difenoconazole me te azoxystrobin kei roto hoki i nga whakaritenga maha e whakamahia ana mo te tukatuka i nga rawa purapura, me nga whakaritenga e tika ana mo te tukatuka tipu otaota (State catalog ..., 2020).
Ko te tipu tipu o te I. crassa i akohia i runga i te papaahoahoaho (Whakaahua 2) me nga rereketanga rereke o nga taputapu kaha: fludioxonil (EC50 = 0.4 ppm), azoxystrobin (EC50 = 4 ppm), me te difenoconazole (EC50 = 7.4 ppm) (Ripanga 2). Ko enei whakaritenga ka kiia he tino whaihua mo te I. crassa, na te mea ko te EC50 he iti ake i te kukume o te whakarite i roto i te waipiro mahi e whakamahia ana mo te whakaora i nga kūmara. E ai ki te State Catalog ... (2020), ko te kukume o te fludioxonil ki te waipiro hei whakaora i nga kūmara potato mai i te 500 ki te 1000 ppm, azoxystrobin (kei roto i te waipiro hei whakaora i te pito o te moa) - 3750-9375 ppm, difenoconazole (kei roto i te wai hei rongoa i nga otaota otaota) - 187.5– 625 ppm.
Ripanga 1. Te orite o te raupapa o nga momo-raupapa raupapa o te taatari 18KSuPT2 me nga taumahatanga o te Ilyonectria crassa e waatea ana i te papaarangi Genbank
Tapeke | Te tipu whakato, te papa o te whakaputa | Ko nga tau raupaparanga kua whakatakotoria ki GenBank, te orau o nga rite | hono | ||
Tuhinga | β-kūmara | TEF 1α | |||
17KSPT1 me 18KSuPT2 | Te kūmara potato, rohe o Kostroma | MH818326 | MH822872 | MK281307 | Chudinova et al., 2019, tenei mahi |
CBS 158/31 | Nga pakiaka Narcissus, Netherlands | JF735276 100 | JF735394 100 | JF735724 99.3 | Cabral et al., 2012 |
CBS 139/30 | Maama Lily, Netherlands | JF735275 100 | JF735393 99.7 | JF735723 99.3 |
|
NSAC-SH-1 | Pakiaka Ginseng, Canada | AY295311 99.4 | JF735395 100 | JF735 / 725 99.6 |
|
RHS235138 | Rau Tulip, UK | KJ475469 100 | KJ513266 100 | ND | Denton, Denton, 2014 |
MT294410 | Nga pakiaka Aspen, Canada | MT294410 100 | ND | ND | Ramsfield et al., 2020 |
ER1937 | Beech, Itari | KR019363 99.65 | ND | ND | Tizzani, Haegi, Motta. Te tuku tika |
KAUF19 | Te kūmara potato, Saudi Arabia | HE649390 98.3 | ND | ND | Gashgari, Gherbawy, 2013 |
ND = kaore i whakatakotoria
Ripanga 2. Te aukati i te Ilyonectria crassa ki te fungicides
(matū hohe) | EC50, ppm | ||||
3 ra | 5 ra | 7 ra | |||
Ngā mana | 17 ± 2 | 33 ± 5 | 47 ± 3 | ||
Quadris, KS (fsoxystrobin) | 18 ± 1 | 34 ± 2 | 48 ± 2 | ||
11 ± 1 | 11 ± 1 | 12 ± 1 | |||
11 ± 1 | 11 ± 1 | 12 ± 1 | |||
Maxim, KS (fludioxonil) | 16 ± 1 | 28 ± 2 | 48 ± 2 | ||
7 ± 1 | 13 ± 3 | 19 ± 4 | |||
5 ± 1 | 12 ± 1 | 17 ± 5 | |||
Skor, EC (difenoconazole) | 18 ± 1 | 35 ± 2 | 48 ± 1 | ||
11 ± 1 | 24 ± 3 | 35 ± 4 | |||
11 ± 1 | 13 ± 1 | 17 ± 3 |
I a maatau mahi, i wehe ke au i nga taumahatanga I. crassa mai i nga kūmara potato i nga rohe o Kostroma me Moscow (Chudinova et al., 2019). He nui te rahi o nga momo harore me nga raupapa ITS e rite ana ki te I. crassa i whakakitea mai i te wa e wetewete ana i te mycobiota o nga kūmara potato i Saudi Arabia (Gashgari and Gherbawy, 2013). Te ahua, ko te I. crassa ehara i te mea onge ki nga riwai me te mea pea. I puta i a maatau whakamatautau ka pangia e te harore te hua pirati kua pakaru. E mohiotia ana mai i nga tuhinga e kaha ana te I. crassa ki te whanake i te oneone saprotrophically (Moll et al., 2016), me te pa ki nga momo tipu, tae atu ki nga momo taakawai tae atu ki nga daffodil, rengarenga, ginseng, aspen, me te beech (Ripanga 1). kotahi). Te ahua, he maha nga tipu mohoao me te maara ka waiho hei rahui mo I. crassa. I runga ake nei e whakaatu ana i te wa e whanakehia ana nga tikanga tiaki, me whai whakaaro ki te paanga o nga kūmara riwai me tenei harore. Ko te whaanuitanga o te whakarite mo te rongoa i nga kūmara potato kei roto i te fludioxonil, azoxystrobin me te difenoconazole kua kitea te kaha o te fungicidal ki a I. crassa.
I tautokohia tenei mahi e te Russian Foundation mo te Rangahau Taketake (Grant No. 20-016-00139).
I whakaputahia te tuhinga ki te hautaka "Bulletin Protection Protection", 2020, 103 (3)